培养条件：
EVO视讯的细胞培养条件包括气相组成为95%空气和5%二氧化碳，培养温度设定为37℃，培养基为MEM加10% FBS和1% P/S。对于贴壁细胞和悬浮细胞，基本培养环境一致。

传代方法：
在第一次传代中，建议采用1:2的比例进行分瓶培养。如果细胞汇合度未超过80%，请将培养瓶中的完全培养液收集于离心管，保留5ml培养基并继续在37℃、5% CO2环境中培养。若细胞密度已超过80%，则可以进行传代。

换液情况：
每隔两天需更换培养液，以保持细胞的良好生长环境。

注意事项：
在接收到EVO视讯的细胞后，请使用75%酒精对细胞瓶进行消毒，随后在超净台内进行无菌操作。将细胞瓶放置于37℃、5% CO2的培养箱中静置3-4小时以调整状态，然后再进行后续操作。

细胞观察：
需要定期使用显微镜观察细胞的生长情况，并进行拍照存档（建议使用40x、100x、200x倍镜拍摄各一张），前三天的照片是重要的售后依据，未提供照片默认为细胞状态良好。

细胞传代步骤：
1. 弃去培养上清，使用不含钙、镁离子的PBS清洗细胞1-2次。
2. 添加约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液至培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，观察细胞的消化情况。若大部分细胞变圆并脱落，立即返回操作台，用培养基终止消化。
3. 轻轻吹打细胞，使其完全脱落后转移至15ml离心管，1000rpm离心5分钟，弃去上清，补加1-2ml完全培养基重悬。
4. 根据需要将细胞悬液按1:2的比例分瓶传代，并补充新的完全培养基至每瓶5-8ml，最后放入37℃、5% CO2的培养箱中培养。

对于悬浮细胞的传代步骤：
采用半换液法时，竖着放置培养瓶在培养箱静置约1小时，轻轻吸掉约3ml培养基，补给3ml完全培养基。如果培养基变色慢，可以直接加500ul的FBS。在传代时可以补充5ml的培养基，分为两个培养瓶进行培养。

细胞冻存与复苏：
对于细胞的冻存，请在细胞生长至达到80%覆盖面积时，用PBS清洗，并添加胰蛋白酶消化液，终止反应后沉淀细胞并加入灭活的冻存液，充分混匀后转移至冻存管。细胞需要在-80℃冰箱保存24小时后才能转入液氮罐。复苏时需快速解冻，随后重悬于培养基中并接种于新的培养瓶中。

在整个细胞培养和冻存的过程中，使用EVO视讯的产品和服务能够确保细胞的高活性和稳定生长。在细胞研究和实验中，选择EVO视讯为您提供的专业技术和优质培养基，是您成功的关键。